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1. 怎么溶解多肽?
大多数肽的首选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽, 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。 2. 何种氨基酸易在合成肽中出现问题? 很多时候还不清楚为何在多肽合成中有些序列会遇见问题,而有时一些相对易合成的序列在纯化中又出现未知问题。然而,避免一些易出问题的序列能显著降低合成成本和缩短交货期。 3. 我的多肽能被分装吗? 是的,中科天马肽工程中心有限公司能够为您免费提供分瓶服务。 4. 什么纯度才是合适的?
5. 如果多肽是95%纯度的,那另外5%是什么?
在RP-HPLC纯化过程中,某些残缺肽具有与完整肽链相似的保留特性。尽管主要的残缺肽已经被去除,但仍有一部分留下来影响了多肽纯度。
净肽含量与总肽含量的定义是不同的。净肽含量等于实际多肽物质减去负离子,盐分,有吸收的水分以及溶剂后的百分比,它是我们通常所说的多肽纯度。 总肽含量是指多肽加上所有无法去除的残余物质,实际上就是成品多肽。净肽含量占据了成品多肽80%的重量,这个数据可以通过氨基酸分析来获得。 6. 该如何储藏多肽? 为保证稳定性,我们推荐您在-20 ℃ 保存多肽。若多肽为液态形式您还应将其分装储藏以保证活性等特性。 7. 什么是多肽净含量? 对多肽称重其重量组成中除了肽还有水分,吸水溶剂,平衡离子和盐。多肽净含量是表征多肽实际重量组成的指标。这个指标通常从50%到90%,依据纯度,序列和合成纯化的策略。不要混淆多肽纯度和含量两个概念。纯度通常指的是由HPLC决定,表征样品所占目标肽比例的数值。多肽净含量则表示非多肽成分所占比例。多肽净含量由氨基酸分析和紫外吸收测试得到。 8. 我该如何处理多肽的末端, 保持原状还是封闭它们? 多肽被用来模拟蛋白和蛋白降解产物。当蛋白质在活体内裂解,末端会自然形成无保护自由端。因此,没有必要在活体内裂解时阻断末端 9. 你可以合成的最长的多肽长度是多少? 中科天马肽工程能够合成超过40个氨基酸残基的多肽序列。 10. CNT用什么方法来合成多肽? CNT通过固相,液相和复合技术来完成多肽合成。 11. 能够提供什么样的质量分析报告? 我们为每一条定制肽提供MS图谱和HPLC图谱。 另外,我们还会在分析报告中提供包括多肽性质和溶解条件在内的信息。如果合成的客户肽不能达到要求的指标,CNT承诺将重新合成直到达到指标,或者退还您所有货款。 12. 合成的多肽最终会是什么形态的? 通常我们的多肽会以冻干粉的形式提供给客户,如无特殊要求,通常为三氟乙酸盐。 13. Biotin 和 Biotin-LC有什么区别? LC(长链)biotin是指biotin和多肽之间隔着一个六炭基团。 14. 如果我定制的环肽当中包含一个Trp,那么这个Trp会被氧化吗? 当环肽被氧化是,Trp由于被保护着而保持还原状态。环化结束后,被氧化的Trp会被纯化掉。任何一个多肽残基氧化后分子量增加产16。 15. 如何是我的多肽保持在还原状态? 将包含半胱氨酸的多肽保存在干燥环境里。当溶解时,使用低浓度和保持酸性。如果有条件允许,可以使用一些还原试剂,如巯基乙醇和二硫苏糖醇。 16. 如何确认多肽是否环化? 如果环化成功,MALDI-MS会现实分子量减少2。另外,HPLC的保留时间也会有所变化。 如果条件允许,Ellman’s test可用来检测游离的硫醇。 17. 抗体产品对多肽纯度的要求是多少呢? CNT建议在多克隆抗体产品中使用大于85%纯度的多肽。尽管低纯度的多肽不会影响抗体反应,但是高纯度多肽会促进后继的筛选和纯化。对于单克隆抗体产品,我们建议使用95%纯度以上的多肽。 |

